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  这年头,“做核酸”成了生活中的必需品。你在焦急等待核酸检测结果的时候,有没有想过这个报告是怎么出来的?对于大多数人来说,“核酸检测”就是在取样点取样。然而,取样只是核酸检测的前奏,真正的核酸检测从样品被送到新冠肺炎核酸检测实验室的那一刻才真正开始。很多人对实验室的印象是仪器高端,自动化程度高,以为检测过程就是把采集的样本放到机器上,结果就会自动产生。然而,目前核酸检测仍然是“半自动”检测项目,检测人员需要在“三级保护”下连续工作多个小时,经历大量复杂的人工程序才能完成检测。而且核酸检测的过程涉及到很多精细的操作,任何一个小的失误都会导致实验的失败。闷热的防护装置,没完没了的负压噪音,高度紧张的操作程序,每一份样本从完成采样到出具核酸报告,都是由检验科的核酸检测人员默默无闻的付出。

  样品接收

  紧密包装的样品到达实验室后,第一步是消毒,然后是双层密封包装和拆包,最后对样品进行分类编号,录入系统。接收程序看起来很简单,其实不然。每天对数千个样品逐一开箱、编号、校对、扫描,速度快,后续的样品提取、检测绝不能耽误;同时,海量样本的信息输入要保证零误差。

  核酸提取

  从样品中提取核酸有两个步骤。检测人员戴着三层手套,手动给生物安全柜内分拣好的样本添加样本。每个样品都经过“拧开盖子-吸样-加样-拧上盖子”的操作程序。几千个样本,几千次重复操作,测试者的手、肩、背的肌肉始终保持高度紧张。这对手速、手劲、视力、脑力都是极大的考验。不能出问题,不能漏,要避免交叉污染。为了监控整个提取和检测过程,需要添加5种质控品,所以一批96个核酸提取程序只能提取91个样本。然后将加入的样品放入核酸提取器,核酸提取正式开始。

  核酸转移

  在准备核酸检测系统之前,要提前准备好PCR试剂,这一步要完全无污染。将准备好的试剂手工分装到96孔扩增板中,需要多少个样品就加多少个,几千个试剂就是几千倍的加样。提取结束后,检测人员会将提取的核酸转移到事先准备好的PCR试剂中,制成反应体系,导入扩增分析区进行PCR检测。由于移液体积在微升级别,这个过程需要严格准确的操作,同时必须做到“快、准、稳”。

  核酸扩增

  经过复杂的准备工作,91个人类核酸检测系统可以用PCR仪进行扩增和检测。扩增检测大概需要2个小时,91人的核酸检测可以不停顿、不停电、不出仪器故障的完成。在上述任何一种情况下,该批核酸样品都需要重新提取核酸。批量加载的模式,中途停不下来,现场做不到。扩增子的数量和质量决定了核酸检测能力。

  结果审查

  扩增后,检测人员需要对扩增结果进行分析。包括扩增曲线分析、基线设置、查看阴阳属性控制的原始数据和结果等。阴阳性控制都在控制中,排除假阳性和假阴性结果,确认后才能审计。至此,一份合格的核酸检测报告完成。

  核酸检测人员默默努力的无名英雄

   24小时开机,收到后马上上检测线,这几乎是检验人员的普遍经验。有时候接到紧急筛查任务已经是晚上了,有的检测人员毅然投入到核酸检测中

  资料来源:丁洁莹、徐蓓慧、甘桂芳、张寒,上海市第九人民医院检验科。

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